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DNA Melting Temperature Assay for Assessing the Stability of DNA Polyplexes Intended for Nonviral Gene Delivery

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Schallon, Anja ; Synatschke, Christopher V. ; Pergushov, Dmitry V. ; Jérôme, Valérie ; Müller, Axel H. E. ; Freitag, Ruth:
DNA Melting Temperature Assay for Assessing the Stability of DNA Polyplexes Intended for Nonviral Gene Delivery.
In: Langmuir. Bd. 27 (2011) Heft 19 . - S. 12042-12051.
ISSN 1520-5827
DOI: https://doi.org/10.1021/la201803c

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Abstract

Many synthetic polycations have the ability to form complexes with the polyanion DNA, yet only a few, most notably poly(ethylene imine) (PEI), are efficient gene-delivery vehicles. Although a common explanation of this observation relies on the buffering capacity of the polycation, the intracellular stability of the complex may also play a role and should not be neglected. Assays typically used to follow complex formation, however, often do not provide the required information on stability. In this article, we propose the change in the DNA melting temperature observable after complex formation to be a significant indicator of complex stability. For a given DNA/polycation ratio, changes in the melting temperature are shown to depend on the polycation chemistry but not on the DNA topology or the polycation architecture. Effects of changes in the DNA/polycation ratio as well as the effect of polycation quaternization can be interpreted using the melting temperature assay. Finally, the assay was used to follow the displacement of DNA from the complexes by poly(methacrylic acid) or short single-stranded DNA sequences as competing polyanions.

Weitere Angaben

Publikationsform: Artikel in einer Zeitschrift
Begutachteter Beitrag: Ja
Zusätzliche Informationen: PMID: 21770418
Institutionen der Universität: Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften
Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften > Fachgruppe Chemie
Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften > Fachgruppe Chemie > Lehrstuhl Makromolekulare Chemie II
Fakultäten > Fakultät für Ingenieurwissenschaften
Fakultäten > Fakultät für Ingenieurwissenschaften > Lehrstuhl Bioprozesstechnik
Fakultäten > Fakultät für Ingenieurwissenschaften > Lehrstuhl Bioprozesstechnik > Lehrstuhl Bioprozesstechnik - Univ.-Prof. Dr. Ruth Freitag
Fakultäten
Titel an der UBT entstanden: Ja
Themengebiete aus DDC: 600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften > 610 Medizin und Gesundheit
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften > 620 Ingenieurwissenschaften
Eingestellt am: 24 Feb 2016 12:58
Letzte Änderung: 24 Feb 2016 12:58
URI: https://eref.uni-bayreuth.de/id/eprint/31027