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Temperature-dependent equilibrium between the open and closed conformation of the p66 subunit of the HIV-1 reverse transcriptase revealed by site-directed spin labelling

Titelangaben

Kensch, Oliver ; Restle, Tobias ; Wöhrl, Birgitta M. ; Goody, Roger S. ; Steinhoff, Heinz-Jürgen:
Temperature-dependent equilibrium between the open and closed conformation of the p66 subunit of the HIV-1 reverse transcriptase revealed by site-directed spin labelling.
In: Journal of Molecular Biology. Bd. 301 (2000) Heft 4 . - S. 1029-1039.
ISSN 0022-2836
DOI: https://doi.org/10.1006/jmbi.2000.3998

Abstract

X-ray crystallographic studies of human immunodeficiency virus type 1 reverse transcriptase complexed with or without substrates or inhibitors show that the heterodimeric enzyme adopts distinct conformations that differ in the orientation of the so-called thumb subdomain in the large subunit. Site-directed spin labelling of mutated residue positions W24C and K287C is applied here to determine the distances between the fingers and thumb subdomains of liganded and unliganded RT in solution. The inter-spin distances of a DNA/DNA and a pseudoknot RNA complexed reverse transcriptase in solution was found to agree with the respective crystal data of the open and closed conformations. For the unliganded reverse transcriptase a temperature-dependent equilibrium between these two states was observed. The fraction of the closed conformation decreased from 95 % at 313 K to 65 % at 273 K. The spectral separation between the two structures was facilitated by the use of a perdeuterated [¹⁵N]nitroxide methane-thiosulfonate spin label.

Weitere Angaben

Publikationsform: Artikel in einer Zeitschrift
Begutachteter Beitrag: Ja
Institutionen der Universität: Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften
Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften > Fachgruppe Chemie
Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften > Fachgruppe Chemie > Lehrstuhl Biochemie mit Schwerpunkt Biophysikalische Chemie
Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften > Fachgruppe Chemie > Ehemalige Professoren > Lehrstuhl Biopolymere - Apl. Prof. Dr. Birgitta Wöhrl
Fakultäten
Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften > Fachgruppe Chemie > Ehemalige Professoren
Titel an der UBT entstanden: Nein
Themengebiete aus DDC: 500 Naturwissenschaften und Mathematik > 540 Chemie
500 Naturwissenschaften und Mathematik > 570 Biowissenschaften; Biologie
Eingestellt am: 17 Mai 2019 07:33
Letzte Änderung: 23 Aug 2022 06:49
URI: https://eref.uni-bayreuth.de/id/eprint/48976