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Rausch, Jason W. ; Arts, Eric J. ; Wöhrl, Birgitta M. ; Le Grice, Stuart F.J.:
Involvement of C-terminal structural elements of Equine Infectious Anemia Virus reverse transcriptase in DNA polymerase and ribonuclease H activities.
In: Journal of Molecular Biology.
Bd. 257
(1996)
Heft 3
.
- S. 500-511.
ISSN 0022-2836
DOI: https://doi.org/10.1006/jmbi.1996.0181
Abstract
In order to investigate the modes of DNA synthesis supported by the 66 and 51 kDa subunits of equine infectious anemia virus reverse transcriptase (EIAV RT), recombinant p66 polypeptides containing a modified ribonuclease H (RNase H) domain were purified and evaluated. Defined heteropolymeric template-primer combinations and high-resolution gel electrophoresis provided a qualitative evaluation of DNA polymerase and RNase H activities, while DNase I footprinting revealed features of replication complexes containing the truncated enzymes. Removal of α-helix E′ and the conserved β5′-αE′ “His-loop” in p66Δ20 RT uncouples the RNase H activities, alters affinity for template-primer and dictates how the replicating enzyme responds to secondary structure on both DNA and RNA templates. Despite these alterations, DNase I footprinting shows no major difference in the overall structure of DNA-directed DNA synthesis complexes. In contrast, removing 47 C-terminal residues, which includes α-helix D′, β-strand 5′ and α-Helix E′, yields an enzyme with distributive DNA polymerase properties closely resembling the purified p51 subunit.
Weitere Angaben
| Publikationsform: | Artikel in einer Zeitschrift |
|---|---|
| Begutachteter Beitrag: | Ja |
| Institutionen der Universität: | Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften > Fachgruppe Chemie Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften > Fachgruppe Chemie > Lehrstuhl Biochemie mit Schwerpunkt Biophysikalische Chemie Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften > Fachgruppe Chemie > Ehemalige Professoren > Lehrstuhl Biopolymere - Apl. Prof. Dr. Birgitta Wöhrl Fakultäten Fakultäten > Fakultät für Biologie, Chemie und Geowissenschaften > Fachgruppe Chemie > Ehemalige Professoren |
| Titel an der UBT entstanden: | Nein |
| Themengebiete aus DDC: | 500 Naturwissenschaften und Mathematik > 540 Chemie 500 Naturwissenschaften und Mathematik > 570 Biowissenschaften; Biologie |
| Eingestellt am: | 20 Mai 2019 07:30 |
| Letzte Änderung: | 20 Mai 2019 07:30 |
| URI: | https://eref.uni-bayreuth.de/id/eprint/48997 |